RBM47 Plasmide Double Nickase (m): sc-434185-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- RBM47 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il RBM47 Double Nickase Plasmid (m) e il RBM47 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Rbm47. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
RBM47 Plasmide Double Nickase (m) | sc-434185-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
RBM47 Plasmide Double Nickase (m2) | sc-434185-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Rbm47 codifica per la proteina RBM47 contenente il motivo di legame all’RNA, un regolatore conservato dell’espressione genica post-trascrizionale che si lega a specifici trascritti per influenzare la stabilità dell’mRNA, la sua localizzazione e lo splicing alternativo. Nelle cellule di topo, RBM47 contribuisce a programmi di processamento dell’RNA che modellano la differenziazione epiteliale e gli output trascrizionali in risposta allo stress, interfacciandosi con vie più ampie del metabolismo dell’RNA che includono fattori associati allo spliceosoma e la sorveglianza dell’RNA. Un’attività alterata di RBM47 è stata associata a reti di espressione genica deregolate rilevanti per lo sviluppo e per la plasticità epitelio–mesenchimale, rendendola un nodo utile per studiare i meccanismi che collegano la regolazione dell’RNA alle transizioni di stato cellulare. Queste caratteristiche rendono RBM47 un bersaglio pertinente per analizzare come le proteine leganti l’RNA coordinino il rimodellamento del trascrittoma in fisiologia normale e in contesti rilevanti per la malattia.
RBM47 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Rbm47 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Rbm47. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Rbm47. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Rbm47 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.