Prickle2 Plasmide Double Nickase (m): sc-433985-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Prickle2 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Prickle2 Double Nickase Plasmid (m) e il Prickle2 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Prickle2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Prickle2 Plasmide Double Nickase (m) | sc-433985-NIC | 20 µg | $410.00 |
Mouse Prickle2 codifica una componente fondamentale del ramo della polarità cellulare planare (PCP) della segnalazione Wnt e funge da scaffold che aiuta a organizzare complessi proteici asimmetrici nella corteccia cellulare. PRICKLE2 contribuisce a comportamenti cellulari polarizzati, tra cui la crescita dei neuriti, lo sviluppo delle sinapsi e una dinamica coordinata del citoscheletro, attraverso interazioni con Dishevelled e altri fattori correlati della PCP. Nel sistema nervoso, Prickle2 sostiene la connettività neuronale e la maturazione dei circuiti, processi che si intersecano con la segnalazione del calcio, il rimodellamento dell’actina e il traffico vescicolare. Studi genetici e funzionali collegano l’alterazione di PRICKLE2 a fenotipi neuroevolutivi e neuropsichiatrici, rendendolo rilevante per la ricerca meccanicistica nello sviluppo cerebrale e nella biologia sinaptica.
Prickle2 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Prickle2 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Prickle2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Prickle2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Prickle2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.