PHC2 Plasmide Double Nickase (h): sc-407705-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- PHC2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il PHC2 Double Nickase Plasmid (h) e il PHC2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira PHC2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
PHC2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-407705-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
PHC2 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-407705-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PHC2 codifica Polyhomeotic homolog 2, una subunità centrale del complesso repressivo Polycomb 1 (PRC1) che contribuisce a mantenere un silenziamento trascrizionale stabile attraverso la compattazione della cromatina e l’ubiquitinazione della lisina 119 dell’istone H2A. Contribuendo alla memoria epigenetica, PHC2 sostiene il controllo dei programmi di espressione genica dello sviluppo, la specificazione di linea e la regolazione a lungo termine dell’identità cellulare. La disregolazione delle proteine del gruppo Polycomb, inclusa PHC2, è associata a stati di differenziamento alterati e a proliferazione aberrante, rendendo PHC2 un bersaglio rilevante per studi sulla regolazione genica basata sulla cromatina. PHC2 è quindi comunemente studiato nel contesto delle reti di repressione trascrizionale e delle vie dipendenti da PRC1 che modulano l’organizzazione del genoma.
PHC2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus PHC2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di PHC2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di PHC2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con PHC2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.