PCGF5 Plasmide Double Nickase (h): sc-416432-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- PCGF5 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il PCGF5 Double Nickase Plasmid (h) e il PCGF5 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira PCGF5. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
PCGF5 Plasmide Double Nickase (h) | sc-416432-NIC | 20 µg | $410.00 |
PCGF5 (polycomb group ring finger 5) codifica una proteina con dominio RING finger che si associa ai complessi del gruppo Polycomb e contribuisce alla repressione genica dipendente dalla cromatina. Attraverso la regolazione delle modificazioni istoniche e dell’architettura della cromatina di ordine superiore, PCGF5 aiuta a controllare programmi trascrizionali coinvolti nell’identità cellulare, nella differenziazione e nel patterning dello sviluppo. PCGF5 è stata collegata a vie di silenziamento mediate da Polycomb che si intersecano con il controllo del ciclo cellulare e la specificazione di linea, processi spesso alterati in contesti di cancro e di malattie del neurosviluppo. Le sue interazioni molecolari all’interno di assemblaggi correlati a PRC1 la rendono un bersaglio utile per analizzare la regolazione epigenetica delle reti geniche nelle cellule umane.
PCGF5 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus PCGF5 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di PCGF5. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di PCGF5. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con PCGF5 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.