PABPC4 Plasmide Double Nickase (h): sc-411206-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- PABPC4 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il PABPC4 Double Nickase Plasmid (h) e il PABPC4 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira PABPC4. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
PABPC4 Plasmide Double Nickase (h) | sc-411206-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
PABPC4 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-411206-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PABPC4 (poly(A)-binding protein cytoplasmic 4) è una proteina legante l’RNA che si associa alle code poli(A) degli mRNA maturi per regolare la stabilità dei trascritti, l’inizio della traduzione e il turnover dell’mRNA nel citoplasma. Coinvolgendo complessi core di ribonucleoproteine messaggere (mRNP) e interagendo con fattori della traduzione, PABPC4 contribuisce a coordinare programmi di espressione genica post-trascrizionali che plasmano l’attivazione cellulare e le risposte allo stress. PABPC4 è stata studiata nel contesto della biologia ematopoietica e immunitaria, dove alterazioni del processamento dell’mRNA e del controllo della traduzione possono contribuire a proliferazione disregolata e a segnali infiammatori. La perturbazione delle dinamiche delle mRNP dipendenti da PABPC4 è rilevante anche per indagare meccanismi di malattia legati a un metabolismo dell’RNA aberrante.
PABPC4 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus PABPC4 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di PABPC4. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di PABPC4. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con PABPC4 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.