OMP Plasmide Double Nickase (m): sc-422061-NIC

Il gene **Omp** del topo codifica la **proteina marker olfattiva (OMP)**, una proteina citosolica fortemente arricchita nei neuroni sensoriali olfattivi maturi, dove supporta un’efficiente trasduzione del segnale evocata dagli odori. OMP modula l’eccitabilità neuronale e la cinetica di risposta in parte plasmando la segnalazione dipendente dai nucleotidi ciclici e le dinamiche del calcio a valle dell’attivazione del recettore odorante nelle ciglia olfattive. Grazie al suo ruolo nella maturazione dei neuroni sensoriali e nella funzione sinaptica all’interno dei circuiti olfattivi, alterazioni dell’espressione o della funzione di **Omp** vengono utilizzate per studiare i meccanismi alla base di iposmia/anosmia e, più in generale, contesti neuroevolutivi o neurodegenerativi in cui risulta compromessa l’elaborazione sensoriale. **Omp** è quindi un marcatore molecolare ampiamente impiegato e un nodo funzionale utile per analizzare la biologia della via olfattiva e le transizioni di stato dei neuroni.

OMP Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Omp nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Omp. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Omp. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.

Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Omp interrotto.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.