OLFM2 Plasmide Double Nickase (m): sc-434096-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- OLFM2 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il OLFM2 Double Nickase Plasmid (m) e il OLFM2 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Olfm2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
OLFM2 Plasmide Double Nickase (m) | sc-434096-NIC | 20 µg | $410.00 |
Olfm2 codifica l’olfactomedina 2 (OLFM2), una glicoproteina secreta/associata alla matrice extracellulare (ECM) arricchita nei tessuti neurali, che contribuisce all’organizzazione della matrice extracellulare e alla comunicazione cellula-cellula. OLFM2 è stata collegata alla differenziazione neuronale, alla crescita dei neuriti e a processi legati alle sinapsi attraverso interazioni con componenti di membrana e della matrice che influenzano adesione e segnalazione. In modelli murini e in studi di associazione nell’uomo, un’alterata attività di OLFM2 è stata connessa a fenotipi neuroevolutivi e neurodegenerativi, includendo vie pertinenti all’integrità delle cellule gangliari retiniche e alle risposte allo stress. Queste caratteristiche rendono Olfm2 un bersaglio utile per analizzare la regolazione dei circuiti neurali mediata dalla ECM e la vulnerabilità in contesti rilevanti per la malattia.
OLFM2 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Olfm2 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Olfm2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Olfm2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Olfm2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.