N4BP2 Plasmide Double Nickase (h): sc-412585-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- N4BP2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il N4BP2 Double Nickase Plasmid (h) e il N4BP2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira N4BP2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
N4BP2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-412585-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
N4BP2 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-412585-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
N4BP2 (NEDD4 binding protein 2) codifica una grande proteina intracellulare implicata nella segnalazione associata all’ubiquitina attraverso interazioni con le ligasi E3 della famiglia NEDD4, suggerendo un ruolo nella regolazione del turnover e del traffico proteico. Evidenze emergenti collegano N4BP2 a vie che modellano le risposte immunitarie e infiammatorie, inclusa la modulazione della segnalazione correlata a NF-κB e degli stati di attivazione cellulare. L’alterata espressione o la perturbazione genetica di N4BP2 è stata studiata nel contesto della biologia dei tumori ematologici e solidi, dove il controllo ubiquitina-dipendente della segnalazione e della proteostasi può influenzare proliferazione, risposte allo stress e mantenimento del genoma. Di conseguenza, N4BP2 rappresenta un bersaglio utile per studi meccanicistici sui circuiti dell’ubiquitina e sui programmi trascrizionali a valle nelle cellule umane.
N4BP2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus N4BP2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di N4BP2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di N4BP2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con N4BP2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.