MR1 Plasmide Double Nickase (m): sc-420785-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- MR1 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il MR1 Double Nickase Plasmid (m) e il MR1 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Mr1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
MR1 Plasmide Double Nickase (m) | sc-420785-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MR1 Plasmide Double Nickase (m2) | sc-420785-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MR1 del topo (MHC class I-related protein 1) è una molecola di presentazione dell’antigene non classica che lega piccoli ligandi derivati da metaboliti e li espone sulla superficie cellulare per il riconoscimento da parte delle cellule T invarianti associate alle mucose (MAIT). Attraverso questo asse MR1–MAIT, MR1 contribuisce alla sorveglianza immunitaria e a rapide risposte citochiniche nei tessuti di barriera, collegando lo stato metabolico cellulare all’attivazione di cellule T di tipo innato. La segnalazione dipendente da MR1 influenza i programmi infiammatori e le risposte dell’ospite ai metaboliti microbici, rendendola rilevante per studi su infezioni, immunità mucosale e regolazione immunitaria in modelli di malattie infiammatorie. Alterazioni nella presentazione mediata da MR1 e nell’attività delle cellule MAIT vengono inoltre indagate in ambito di immunologia dei tumori e di infiammazione metabolica, per comprendere come la disponibilità di ligandi plasmi la funzione immunitaria.
MR1 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Mr1 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Mr1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Mr1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Mr1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.