MAZ Plasmide Double Nickase (h): sc-403775-NIC

MAZ (proteina a dita di zinco associata a Myc) è un fattore di trascrizione che si lega al DNA ricco in GC, riconosce gli elementi GA box e modula la trascrizione dipendente dall’RNA polimerasi II in regioni prossimali al promotore. Partecipa alla regolazione della progressione del ciclo cellulare, dei programmi di differenziamento e dell’espressione genica responsiva allo stress, e può influenzare l’architettura della cromatina tramite interazioni con cofattori trascrizionali. MAZ è stato associato al controllo dell’espressione di oncogeni e citochine, incluse reti trascrizionali associate a MYC, risultando quindi rilevante per studi su proliferazione e segnalazione infiammatoria. Un’attività di MAZ deregolata o un uso alterato di promotori controllati da MAZ è stato osservato in molteplici contesti tumorali ed è oggetto di studio anche in relazione al rimodellamento trascrizionale in vie metaboliche e immunitarie.

MAZ Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus MAZ nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di MAZ. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di MAZ. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.

Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con MAZ interrotto.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.