Plasmide Double Nickase (h) MAP-7: sc-411239-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) MAP-7 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide MAP-7 Double Nickase (h) et le plasmide MAP-7 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant MAP7. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) MAP-7 | sc-411239-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) MAP-7 | sc-411239-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MAP7 code la protéine associée aux microtubules 7 (MAP-7), un facteur de stabilisation des microtubules qui soutient leur polymérisation et leur organisation et favorise le transport de cargaisons dépendant de la kinésine-1. En modulant la dynamique des microtubules, MAP-7 contribue au trafic intracellulaire, à la polarité cellulaire et aux processus de remodelage du cytosquelette qui influencent la croissance des neurites et le comportement du fuseau mitotique. Une expression altérée de MAP7 ou une activité de liaison aux microtubules modifiée peut perturber les réseaux de signalisation et de transport dépendants du cytosquelette, ce qui en fait une cible pertinente pour les études de neurobiologie et des états cellulaires prolifératifs. En tant que régulateur du cytosquelette, MAP-7 est fréquemment étudiée dans des contextes où la stabilité des microtubules croise les réponses au stress, les programmes de différenciation et les changements d’architecture cellulaire associés à des phénotypes pathologiques.
MAP-7 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus MAP7 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de MAP7. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de MAP7. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de MAP7.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.