LSm11 Plasmide Double Nickase (h): sc-406646-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- LSm11 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il LSm11 Double Nickase Plasmid (h) e il LSm11 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira LSM11. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
LSm11 Plasmide Double Nickase (h) | sc-406646-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
LSm11 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-406646-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
LSM11 codifica LSm11, una proteina legante l’RNA di tipo Sm-like che fa parte della piccola ribonucleoproteina nucleare U7 (U7 snRNP), specializzata nel processamento dell’estremità 3′ dei pre-mRNA degli istoni dipendenti dalla replicazione. Attraverso interazioni con l’U7 snRNA e con fattori associati come l’asse FLASH/NPAT, LSm11 sostiene l’espressione dei geni degli istoni legata alla fase S, l’assemblaggio della cromatina e la stabilità del genoma durante la progressione del ciclo cellulare. L’alterazione di questa via può perturbare la disponibilità di istoni, la tempistica di replicazione e le risposte al danno del DNA, processi frequentemente studiati in contesti di stress proliferativo e oncogenico. LSm11 è quindi rilevante per studi meccanicistici sulla regolazione del ciclo cellulare accoppiata al processamento dell’RNA e sulle conseguenze del processamento aberrante dell’mRNA degli istoni.
LSm11 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus LSM11 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di LSM11. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di LSM11. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con LSM11 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.