JunB Plasmide Double Nickase (h): sc-400493-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- JunB Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il JunB Double Nickase Plasmid (h) e il JunB Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira JUNB. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: JunB Antibody (C-11): sc-8051
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
JunB Plasmide Double Nickase (h) | sc-400493-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
JunB Plasmide Double Nickase (h2) | sc-400493-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
JUNB codifica JunB, un fattore di trascrizione con motivo a cerniera di leucina all’interno del complesso AP-1, che integra le vie di segnalazione MAPK/ERK e JNK per regolare programmi di espressione genica dipendenti dallo stimolo. JunB modula la progressione del ciclo cellulare, la differenziazione e le risposte a stress e citochine associandosi alle proteine della famiglia FOS e legandosi ai motivi AP-1 in enhancer e promotori. Attraverso queste reti influenza l’attivazione delle cellule immunitarie e la segnalazione infiammatoria, ed è spesso utilizzato come indicatore delle risposte trascrizionali immediate-early. Un’attività deregolata di JUNB è stata implicata nel rimaneggiamento trascrizionale oncogenico e in fenotipi immunitari alterati, a sostegno del suo studio nella biologia dei tumori e nelle vie associate all’infiammazione.
JunB Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus JUNB nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di JUNB. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di JUNB. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con JUNB interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.