JMJD2A Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-432966-NIC

O gene **Kdm4a** de camundongo codifica a desmetilase de lisina **JMJD2A (KDM4A)**, uma enzima que contém o domínio **Jumonji C** e remove marcas repressoras de histonas, como **H3K9me3/me2** e **H3K36me3/me2**, para regular a acessibilidade da cromatina e programas transcricionais. A JMJD2A participa do controle epigenético da progressão do ciclo celular, da replicação e do reparo do DNA e da expressão gênica específica de linhagem, integrando-se a redes de remodelamento de cromatina e de fatores de transcrição. Por seus efeitos na organização da heterocromatina e na estabilidade do genoma, **Kdm4a** é frequentemente estudado em vias associadas a estados transcricionais oncogênicos, proliferação aberrante e respostas ao estresse. A atividade desregulada de JMJD2A tem sido associada a alterações de diferenciação e fenótipos de transformação, sustentando seu uso como um nó mecanístico em pesquisas de epigenômica relevantes para doenças.

JMJD2A O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Kdm4a em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Kdm4a. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Kdm4a. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Kdm4a interrompido.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.