Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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INSM1 Plasmide Double Nickase (h): sc-402424-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- INSM1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il INSM1 Double Nickase Plasmid (h) e il INSM1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira INSM1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: INSM1 Antibody (A-8): sc-271408
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
INSM1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-402424-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
INSM1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-402424-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
INSM1 (insulinoma-associated 1) codifica un fattore di trascrizione a dita di zinco che agisce come regolatore chiave dell’impegno di linea e della differenziazione neuroendocrina. INSM1 modula programmi di espressione genica che controllano l’uscita dal ciclo cellulare, la macchina secretoria neuronale ed endocrina e la repressione trascrizionale associata alla cromatina, integrando segnali che modellano lo sviluppo endocrino e neuronale. La sua espressione è normalmente limitata ai tessuti neuroendocrini in sviluppo, ma viene spesso riattivata nelle neoplasie neuroendocrine, dove funge da marcatore molecolare ampiamente utilizzato dell’identità neuroendocrina. Le reti trascrizionali incentrate su INSM1 intersecano vie che regolano lo stato di differenziazione e la proliferazione, rendendolo rilevante per studi meccanicistici sulla biologia dei tumori neuroendocrini e sulla plasticità cellulare.
INSM1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus INSM1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di INSM1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di INSM1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con INSM1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.