IL-12Rβ2 Plasmide Double Nickase (h): sc-406442-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- IL-12Rβ2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il IL-12Rβ2 Double Nickase Plasmid (h) e il IL-12Rβ2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira IL12RB2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: IL-12Rβ2 Antibody (2H6): sc-293379
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
IL-12Rβ2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-406442-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IL-12Rβ2 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-406442-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
IL12RB2 umano codifica la subunità β2 del recettore dell’IL-12, un componente essenziale del complesso recettoriale ad alta affinità per l’IL-12 insieme a IL12RB1, espresso prevalentemente su cellule T attivate e cellule NK. In seguito al legame con l’IL-12, IL-12Rβ2 media l’attivazione di JAK2/TYK2 e la successiva fosforilazione di STAT4, promuovendo la polarizzazione Th1, la produzione di IFN-γ e la programmazione degli effettori citotossici. Questo asse di segnalazione si integra con le reti di citochine infiammatorie per modellare l’immunità cellulo-mediata e l’immunosorveglianza. Un’espressione o una segnalazione disregolata di IL12RB2 è stata associata ad alterazioni della reattività immunitaria in contesti di infezione, autoimmunità ed evasione immunitaria associata ai tumori, rendendolo un bersaglio utile per studi meccanicistici sulla differenziazione e la funzione guidate dalle citochine.
IL-12Rβ2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus IL12RB2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di IL12RB2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di IL12RB2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con IL12RB2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.