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HXK II慢病毒激活颗粒(h) | sc-400611-LAC | 200 µl | $455.00 |
人类 HK2 基因编码己糖激酶 II(HXK II),这是一种与线粒体相关的酶,催化葡萄糖在 ATP 依赖下磷酸化生成葡萄糖-6-磷酸,从而使葡萄糖进入糖酵解及其下游的合成代谢通路。通过将葡萄糖利用与线粒体代谢相连接,HXK II 支持糖酵解通量、进入磷酸戊糖途径,并通过与 HIF-1 信号及 PI3K–AKT–mTOR 调控程序的整合,促进缺氧条件下的代谢适应。HK2 活性常与增殖状态下的代谢重编程相关,其中糖酵解升高及氧化还原处理方式的改变会影响细胞存活与生物合成能力。因此,HK2/HXK II 被广泛用作研究人类细胞中葡萄糖感知、线粒体—代谢耦联以及与疾病相关代谢表型的关键机制节点。
HXK II 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 HK2 表达。
HXK II 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在HK2转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性HXK II表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 HK2 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。