Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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HSF1 Plasmide Double Nickase (m): sc-420971-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- HSF1 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il HSF1 Double Nickase Plasmid (m) e il HSF1 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Hsf1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: HSF1 Antibody (E-4): sc-17757
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
HSF1 Plasmide Double Nickase (m) | sc-420971-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
HSF1 Plasmide Double Nickase (m2) | sc-420971-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il fattore di shock termico 1 (HSF1), codificato dal gene murino *Hsf1*, è un regolatore trascrizionale “master” della risposta allo shock termico che mantiene la proteostasi durante stress termico e proteotossico. Una volta attivato, HSF1 trimerizza e si lega agli elementi di shock termico (HSE) per indurre chaperoni molecolari come HSP70 e HSP90, coordinando il ripiegamento proteico, il controllo qualità e il recupero dal danno cellulare. HSF1 si integra con vie che controllano l’omeostasi proteica, l’autofagia, l’apoptosi e l’adattamento metabolico, modulando la sopravvivenza cellulare sotto stress. Un’attività deregolata di HSF1 è stata collegata a processi rilevanti per neurodegenerazione, invecchiamento, infiammazione e programmi di stress associati al cancro, rendendolo un nodo chiave per studi meccanicistici in modelli murini.
HSF1 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Hsf1 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Hsf1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Hsf1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Hsf1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.