GNL3L Plasmide Double Nickase (h): sc-412308-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- GNL3L Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il GNL3L Double Nickase Plasmid (h) e il GNL3L Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira GNL3L. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
GNL3L Plasmide Double Nickase (h) | sc-412308-NIC | 20 µg | $410.00 |
GNL3L (guanine nucleotide-binding protein-like 3-like) è una proteina nucleolare legante il GTP, implicata nella biogenesi dei ribosomi e nell’organizzazione del nucleolo, con ruoli nella regolazione della progressione del ciclo cellulare e della proliferazione. Partecipa al processamento dell’RNA e all’assemblaggio di complessi ribonucleoproteici, collegando la funzione nucleolare ai programmi di controllo della crescita. Un’espressione alterata di GNL3L è stata riportata in contesti proliferativi ed è studiata in relazione alla biologia tumorale e alle risposte allo stress cellulare che influenzano l’omeostasi del nucleolo. Queste caratteristiche rendono GNL3L un bersaglio utile per indagare come le GTPasi nucleolari coordinino la produzione dei ribosomi con le decisioni sul destino cellulare.
GNL3L Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus GNL3L nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di GNL3L. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di GNL3L. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con GNL3L interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.