Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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GLUD1 Plasmide Double Nickase (h): sc-402187-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- GLUD1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il GLUD1 Double Nickase Plasmid (h) e il GLUD1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira GLUD1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
GLUD1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-402187-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GLUD1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-402187-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GLUD1 codifica la glutammato deidrogenasi mitocondriale 1, un enzima che catalizza la deaminazione ossidativa reversibile del glutammato in α-chetoglutarato e ammoniaca, collegando il catabolismo degli amminoacidi al ciclo dell’acido tricarbossilico (TCA) e alla bioenergetica cellulare. Regolando il nodo glutammato/α-chetoglutarato, GLUD1 influenza la gestione dell’azoto, l’equilibrio redox e il flusso anaplerotico che sostiene il metabolismo ossidativo. La sua attività interseca vie che controllano la secrezione di insulina e l’omeostasi dei neurotrasmettitori attraverso l’accoppiamento del metabolismo del glutammato alla produzione di ATP e alla funzione mitocondriale. La disregolazione di GLUD1 è stata associata a disturbi del metabolismo degli amminoacidi e a fenotipi neuroendocrini, rendendolo un bersaglio rilevante per lo studio del controllo metabolico nelle cellule umane.
GLUD1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus GLUD1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di GLUD1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di GLUD1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con GLUD1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.