GALK2 Plasmide Double Nickase (h): sc-410788-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- GALK2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il GALK2 Double Nickase Plasmid (h) e il GALK2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira GALK2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
GALK2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-410788-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GALK2 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-410788-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GALK2 codifica la galattochinasi 2, una chinasi citosolica dei carboidrati coinvolta nel metabolismo del galattosio e, più in generale, degli esosi attraverso la fosforilazione del galattosio a galattosio-1-fosfato. Influenzando il flusso attraverso la rete correlata alla via di Leloir e i pool a valle di zuccheri nucleotidici, GALK2 può incidere sulla capacità di glicosilazione e sull’equilibrio energetico cellulare. Un’alterata gestione degli intermedi del galattosio e le relative risposte di stress metabolico è rilevante per gli studi sugli errori congeniti del metabolismo e sui fenotipi tipo-epatocita nei sistemi modello. GALK2 è quindi comunemente studiato nel contesto della regolazione delle vie metaboliche, dell’utilizzo del carbonio e dell’adattamento metabolico in condizioni di perturbazione dei nutrienti.
GALK2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus GALK2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di GALK2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di GALK2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con GALK2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.