FOXF1 Plasmide Double Nickase (h): sc-403521-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- FOXF1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il FOXF1 Double Nickase Plasmid (h) e il FOXF1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira FOXF1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
FOXF1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-403521-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
FOXF1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-403521-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FOXF1 (Forkhead box F1) codifica un fattore di trascrizione della famiglia forkhead che regola la differenziazione mesenchimale, lo sviluppo vascolare e la segnalazione epitelio–mesenchimale durante l’organogenesi. Nelle cellule umane, FOXF1 influenza programmi trascrizionali che controllano il rimodellamento della matrice extracellulare, la migrazione cellulare e l’espressione di geni angiogenici, integrandosi con reti di segnalazione dello sviluppo quali le vie Hedgehog, WNT e TGF-β/SMAD. Alterazioni del dosaggio di FOXF1 o perturbazioni della sua regolazione sono state associate ad anomalie congenite polmonari e vascolari e a una deregolazione dei programmi stromali nella biologia del cancro. In quanto regolatore della linea cellulare e del microambiente, FOXF1 è spesso studiato in modelli di mesenchima polmonare, nelle interazioni endotelio–stroma e nel controllo trascrizionale dello sviluppo.
FOXF1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus FOXF1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di FOXF1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di FOXF1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con FOXF1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.