ErbB4/HER4 Plasmide Double Nickase (h): sc-400275-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- ErbB4/HER4 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il ErbB4/HER4 Double Nickase Plasmid (h) e il ErbB4/HER4 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira ERBB4. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: ErbB4/HER4 Antibody (C-7): sc-8050
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
ErbB4/HER4 Plasmide Double Nickase (h) | sc-400275-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ErbB4/HER4 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-400275-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ERBB4 codifica ErbB4/HER4, un recettore tirosin-chinasico della famiglia EGFR/ErbB attivato da ligandi, che trasduce i segnali provenienti da neureguline e fattori di crescita correlati. Dopo l’attivazione, ErbB4 coinvolge le vie di segnalazione MAPK/ERK e PI3K–AKT e può partecipare a programmi trascrizionali dipendenti da JAK/STAT, influenzando in modo dipendente dal contesto proliferazione, differenziamento e sopravvivenza. ERBB4 supporta inoltre la comunicazione cellula–cellula e processi di sviluppo nei tessuti neurali e cardiaci tramite eterodimerizzazione con altri recettori ErbB e attraverso un processamento regolato del recettore. Un’espressione deregolata di ERBB4, mutazioni o uno squilibrio della sua segnalazione sono implicati nel rimodellamento di vie oncogeniche e in fenotipi di neurosviluppo, rendendolo un bersaglio utile per studi meccanicistici sulle reti di segnalazione recettoriale.
ErbB4/HER4 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus ERBB4 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di ERBB4. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di ERBB4. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con ERBB4 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.