DDX3X Lentiviral Activation Particles (h): sc-401253-LAC

DDX3XはATP依存性のDEAD-box RNAヘリカーゼをコードしており、mRNAの核外輸送、翻訳開始、細胞ストレス時のRNA顆粒ダイナミクスなど、RNA代謝の複数段階を統括します。リボ核タンパク質複合体やシグナル伝達の中間因子との相互作用を介して、DDX3Xは転写後制御を、細胞周期進行、自然免疫センシング、ストレス応答を制御する経路と結び付けます。DDX3X活性の変化はRNA恒常性の破綻や、増殖・分化プログラムの異常な制御と関連しており、神経発達、ウイルスの宿主因子生物学、がんに関連するトランスクリプトーム再構築の研究において重要です。ヒト細胞においてDDX3Xは、平常時およびストレス条件下でRNAヘリカーゼ機能が遺伝子発現の出力をどのように形作るかを解析するための主要な結節点として機能します。

DDX3X レンチウイルス活性化粒子（h）は、完全な相乗的活性化メディエーター（SAM）転写活性化システムを、トランスダクション可能な高力価レンチウイルス粒子に封入することでこのニーズに対応し、より広範なヒト細胞タイプにおいて効率的なDDX3Xの発現上昇を可能にします。

DDX3X レンチウイルス活性化粒子（h）は、レンチウイルス媒介を介して、シナジー活性化メディエーター（SAM）システムのすべての機能的構成要素を届ける。このシステムは、標的細胞へ共導入される3種類の粒子製剤で構成されています。1つは、VP64転写活性化ドメインとブラスティシジン耐性遺伝子を融合させた、触媒活性のないdCas9（D10AおよびN863A変異）をコードするものです。ヒグロマイシン耐性遺伝子を有するMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードするもの；および、2つのMS2 RNAアプタマーと融合した標的特異的20塩基対sgRNAをコードし、プロマイシン耐性遺伝子を有するもの。レンチウイルスによる導入および発現カセットのゲノムへの組み込み後、SAM構成要素は安定して発現し、DDX3X転写開始点の上流にある近位プロモーター領域内の標的座に集合する。そこでは、VP64、p65、およびHSF1が協調して作用し、内因性の転写機構を動員して、内因性DDX3Xの発現を持続的に上向きに調節する。ヌクレアーゼ不活性型dCas9を使用することで、二本鎖DNA切断の導入を回避し、天然のDDX3Xゲノム座および制御機構を維持します。

レンチウイルス形式には、いくつかの実用的な利点があります。安定したゲノム組み込みにより、細胞分裂を経ても遺伝的に継承される活性化がサポートされます。高力価の粒子調製により、施設内でのウイルス生産の必要性がなくなります。また、初代培養細胞、非増殖性細胞、およびトランスフェクション抵抗性細胞との互換性により、実験の適用範囲が広がります。成功したトランスダクションは、プロマイシン、ハイグロマイシン、ブラスティシジンを用いた三重抗生物質選別により確認および選別が可能である。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。