Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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DBP Plasmide Double Nickase (h): sc-403069-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- DBP Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il DBP Double Nickase Plasmid (h) e il DBP Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira GC. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: DBP Antibody (A-5): sc-365441
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
DBP Plasmide Double Nickase (h) | sc-403069-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
DBP Plasmide Double Nickase (h2) | sc-403069-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene umano **GC** codifica per la **proteina legante la vitamina D** (DBP), una glicoproteina plasmatica altamente abbondante che lega e trasporta i metaboliti della vitamina D e contribuisce alla regolazione sistemica dell’omeostasi di calcio e fosfato. Oltre al trasporto della vitamina D, la DBP partecipa allo *scavenging* dell’actina e può influenzare i processi immunitari e infiammatori modulando la rimozione dell’actina extracellulare e le risposte dei leucociti. Le variazioni nei livelli di GC/DBP e nelle proprietà di legame sono state studiate nel contesto di disturbi ossei e del metabolismo minerale, fenotipi metabolici e condizioni infiammatorie. In ambito di ricerca, GC rappresenta un nodo sperimentalmente accessibile per indagare le dinamiche della segnalazione della vitamina D, il crosstalk endocrino e la gestione delle proteine extracellulari.
DBP Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus GC nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di GC. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di GC. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con GC interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.