CX3CR1 Plasmide Double Nickase (m): sc-419886-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- CX3CR1 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il CX3CR1 Double Nickase Plasmid (m) e il CX3CR1 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Cx3cr1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
CX3CR1 Plasmide Double Nickase (m) | sc-419886-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CX3CR1 Plasmide Double Nickase (m2) | sc-419886-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Cx3cr1 codifica il recettore chemiokinico CX3CR1, un recettore accoppiato a proteine G che lega la CX3CL1 (fractalkina) sia ancorata alla membrana sia solubile, regolando l’adesione dei leucociti, la chemiotassi e la sopravvivenza cellulare. Nel topo, CX3CR1 è altamente espresso in monociti/macrofagi, cellule dendritiche e microglia, contribuendo alla sorveglianza immunitaria, al traffico infiammatorio e alla comunicazione neurone–glia. La segnalazione attraverso CX3CR1 modula vie che includono il flusso di calcio mediato da GPCR, PI3K/AKT e MAPK, influenzando la produzione di citochine e le risposte fagocitiche. Un’attività alterata di CX3CR1 è stata implicata nella neuroinfiammazione e nel rimodellamento sinaptico, oltre che nell’infiammazione cardiovascolare e metabolica, supportandone l’impiego in modelli di danno tissutale e nello studio dei meccanismi delle malattie infiammatorie croniche.
CX3CR1 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Cx3cr1 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Cx3cr1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Cx3cr1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Cx3cr1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.