CTRL Plasmide Double Nickase (h): sc-410749-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- CTRL Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il CTRL Double Nickase Plasmid (h) e il CTRL Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira CTRL. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
CTRL Plasmide Double Nickase (h) | sc-410749-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CTRL Plasmide Double Nickase (h2) | sc-410749-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene umano CTRL codifica la proteasi CTRL con attività tipo chimotripsina, una serina endopeptidasi che contribuisce al processamento proteolitico di proteine e peptidi in ambienti digestivi ed extracellulari. In quanto proteasi della famiglia della tripsina, l’attività di CTRL si integra con cascate di attivazione delle proteasi e con la proteolisi regolata, che possono influenzare la maturazione degli ormoni peptidici, la gestione dei nutrienti e la segnalazione locale. Un’attività disregolata delle serin-proteasi è ampiamente associata a risposte infiammatorie e al rimodellamento tissutale, rendendo CTRL un modello utile per studiare l’equilibrio delle reti proteasiche e la specificità proteasi–substrato. La modulazione sperimentale di CTRL supporta studi meccanicistici sulla regolazione di vie mediate da proteasi e sugli effetti a valle sullo stress cellulare e sulla segnalazione infiammatoria.
CTRL Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus CTRL nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di CTRL. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di CTRL. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con CTRL interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.