ChREBP Plasmide Double Nickase (m): sc-425525-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- ChREBP Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il ChREBP Double Nickase Plasmid (m) e il ChREBP Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Mlxipl. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
ChREBP Plasmide Double Nickase (m) | sc-425525-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ChREBP Plasmide Double Nickase (m2) | sc-425525-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Mlxipl codifica la carbohydrate response element–binding protein (ChREBP), un fattore di trascrizione sensibile al glucosio che coordina la conversione dell’eccesso di carboidrati in lipidi inducendo geni della glicolisi e della lipogenesi de novo. Nei tessuti murini come fegato e tessuto adiposo, ChREBP integra il flusso di carboidrati con i programmi genici metabolici a valle del metabolismo del glucosio e della segnalazione insulinica, modellando la sintesi dei trigliceridi, la zonazione metabolica degli epatociti e la funzione degli adipociti. Un’attività di ChREBP deregolata è associata a fenotipi metabolici quali steatosi epatica, insulino-resistenza e alterazioni nella gestione dei lipidi, rendendo Mlxipl un nodo chiave per lo studio del controllo trascrizionale guidato dai nutrienti. In quanto regolatore trascrizionale, ChREBP offre inoltre un punto d’ingresso sperimentalmente maneggevole per indagare il cross-talk tra metabolismo dei carboidrati, lipogenesi e risposte allo stress ossidativo.
ChREBP Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Mlxipl nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Mlxipl. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Mlxipl. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Mlxipl interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.