Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
CALML3 Plasmide Double Nickase (h): sc-400954-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- CALML3 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il CALML3 Double Nickase Plasmid (h) e il CALML3 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira CALML3. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
CALML3 Plasmide Double Nickase (h) | sc-400954-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CALML3 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-400954-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CALML3 (calmodulin-like 3) codifica una proteina EF-hand legante Ca2+ che funziona come sensore del calcio e modulatore della segnalazione dipendente dalla calmodulina. È arricchita nelle linee epiteliali ed è stata collegata al rimodellamento del citoscheletro, all’organizzazione delle giunzioni cellula-cellula e a reti di fosforilazione regolate dal calcio che influenzano proliferazione e differenziamento. L’attività di CALML3 si interseca con vie che controllano la maturazione dei cheratinociti e l’omeostasi epiteliale attraverso la regolazione di enzimi Ca2+-dipendenti e complessi di impalcatura. Un’espressione disregolata è stata riportata in diverse patologie epiteliali, inclusi i tumori, rendendo CALML3 un bersaglio utile per studiare come la segnalazione del calcio riprogrammi i programmi di adesione e crescita.
CALML3 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus CALML3 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di CALML3. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di CALML3. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con CALML3 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.