C14orf118 Plasmide Double Nickase (h): sc-412571-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- C14orf118 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il C14orf118 Double Nickase Plasmid (h) e il C14orf118 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira GPATCH2L. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
C14orf118 Plasmide Double Nickase (h) | sc-412571-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
C14orf118 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-412571-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GPATCH2L (C14orf118) codifica una proteina prevista contenente un dominio G-patch, implicata nella biologia dell’RNA, in linea con ruoli nel legame all’RNA e nella modulazione degli eventi di processamento dell’RNA. Le proteine G-patch interagiscono spesso con elicasi dell’RNA e fattori associati allo spliceosoma, collegandosi così allo splicing del pre-mRNA, alla dinamica dei complessi ribonucleoproteici e, più in generale, al controllo dell’espressione genica. Sebbene C14orf118 rimanga caratterizzata in modo incompleto, l’alterazione delle vie di processamento dell’RNA può influenzare la regolazione del ciclo cellulare, le risposte allo stress e la proteostasi attraverso un rimodellamento a valle del trascrittoma. Di conseguenza, GPATCH2L è di interesse per studi meccanicistici che collegano il metabolismo dell’RNA a fenotipi rilevanti per modelli di cancro e di malattie del neurosviluppo o neurodegenerative, in cui lo splicing e l’omeostasi dell’RNA risultano frequentemente alterati.
C14orf118 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus GPATCH2L nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di GPATCH2L. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di GPATCH2L. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con GPATCH2L interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.