Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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ARID1B Plasmide Double Nickase (h): sc-402365-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- ARID1B Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il ARID1B Double Nickase Plasmid (h) e il ARID1B Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira ARID1B. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: ARID1B Antibody (KMN1): sc-32762
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
ARID1B Plasmide Double Nickase (h) | sc-402365-NIC | 20 µg | $410.00 |
ARID1B codifica una subunità del complesso di rimodellamento della cromatina SWI/SNF (BAF) ATP-dipendente in grado di legare il DNA, che regola il posizionamento dei nucleosomi e l’accessibilità enhancer–promotore per plasmare i programmi trascrizionali. Attraverso il suo ruolo nell’organizzazione della cromatina, ARID1B influenza la specificazione di linea, il controllo del ciclo cellulare e l’espressione genica associata alla differenziazione, interfacciandosi con vie di segnalazione che governano la trascrizione durante lo sviluppo e in risposta allo stress. L’alterazione della funzione di ARID1B modifica la regolazione epigenetica e la fedeltà trascrizionale, rendendolo un fattore chiave negli studi sulla regolazione del genoma. La disregolazione dei componenti di SWI/SNF, incluso ARID1B, è frequentemente indagata nel contesto di disturbi dello sviluppo e di difetti di rimodellamento della cromatina associati al cancro.
ARID1B Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus ARID1B nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di ARID1B. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di ARID1B. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con ARID1B interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.