USP21 Plasmide Double Nickase (h): sc-404690-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- USP21 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il USP21 Double Nickase Plasmid (h) e il USP21 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira USP21. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: USP21 Antibody (B-9): sc-515911
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
USP21 Plasmide Double Nickase (h) | sc-404690-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
USP21 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-404690-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene umano USP21 codifica un enzima deubiquitinante della famiglia delle proteasi specifiche per l’ubiquitina, che rimuove catene di ubiquitina da substrati proteici per modularne stabilità, localizzazione e output di segnalazione. L’attività di USP21 si integra con il controllo ubiquitino-dipendente della segnalazione dell’immunità innata, della regolazione trascrizionale e della proteostasi, influenzando ampiezza e durata delle vie di segnalazione tramite deubiquitinazione reversibile. Modellando la dinamica dell’ubiquitina, USP21 può incidere su decisioni di stato cellulare come le risposte infiammatorie e l’adattamento allo stress, processi spesso alterati nel cancro e nelle patologie immuno-correlate. Una deregolazione dell’espressione o dell’attività di USP21 è stata associata a segnalazione aberrante e a regolazione legata alla cromatina, rendendolo un bersaglio rilevante per studi meccanicistici delle vie dell’ubiquitina.
USP21 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus USP21 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di USP21. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di USP21. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con USP21 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.