Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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TLR5 Plasmide Double Nickase (h): sc-401154-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- TLR5 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il TLR5 Double Nickase Plasmid (h) e il TLR5 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira TLR5. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: TLR5 Antibody (H-11): sc-518106
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
TLR5 Plasmide Double Nickase (h) | sc-401154-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
TLR5 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-401154-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il recettore Toll-like 5 (TLR5) è un recettore di riconoscimento di pattern (PRR) di superficie cellulare che rileva la flagellina batterica e avvia la segnalazione dell’immunità innata nelle cellule epiteliali e nelle linee mieloidi. In seguito al legame con il ligando, TLR5 segnala principalmente attraverso MYD88 per attivare le cascate IRAK–TRAF6, culminando nell’attivazione delle vie NF-κB e MAPK e nell’induzione di citochine e chemochine pro-infiammatorie. TLR5 contribuisce alla difesa dell’ospite a livello mucosale e all’omeostasi tra microbioma e sistema immunitario; inoltre, un’alterata attività di TLR5 è stata collegata a disturbi infiammatori, suscettibilità alle infezioni e infiammazione associata ai tumori. La sua ben definita risposta al ligando rende TLR5 un nodo utile per analizzare il crosstalk tra PRR, i programmi citochinici e i meccanismi di immunità di barriera.
TLR5 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus TLR5 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di TLR5. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di TLR5. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con TLR5 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.