Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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TLR1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m2): sc-423418-KO-2
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- TLR1 Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m2) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico TLR1, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: TLR1 Antibody (H-8): sc-514399
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
TLR1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m2) | sc-423418-KO-2 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
Tlr1 codifica il recettore Toll-like 1 (TLR1) del topo, un recettore di riconoscimento di pattern che forma un eterodimero funzionale con TLR2 per rilevare, sulla superficie cellulare, lipopeptidi batterici triacilati. Il legame con il ligando innesca una segnalazione dipendente da MyD88 e l’attivazione delle cascate di NF-κB e MAPK, promuovendo la trascrizione di citochine e chemochine pro-infiammatorie che modellano l’immunità innata e le successive risposte immunitarie adattative. L’attività di TLR1 influenza l’attivazione di cellule dendritiche e macrofagi, l’immunità di barriera e il crosstalk con i prodotti microbici all’interno del microbioma. Una segnalazione TLR1/TLR2 disregolata è stata associata a fenotipi infiammatori e a un’alterata difesa dell’ospite in modelli di infezione e di patologie immuno-mediate.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO TLR1 (m2) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Tlr1 in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Tlr1 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Tlr1 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina TLR1.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Tlr1 per lo studio della segnalazione di TLR1, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni Tlr1 critici per la funzione di TLR1
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Tlr1 per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal TLR1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal TLR1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Tlr1. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal TLR1 Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR TLR1 (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Tlr1 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Tlr1 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.