Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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TIP120A Plasmide Double Nickase (h): sc-402506-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- TIP120A Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il TIP120A Double Nickase Plasmid (h) e il TIP120A Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira CAND1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: TIP120A Antibody (G-3): sc-137055
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
TIP120A Plasmide Double Nickase (h) | sc-402506-NIC | 20 µg | $410.00 |
CAND1 (TIP120A) codifica un regolatore delle ligasi dell’ubiquitina cullin-RING che si lega alle culline non neddilate e promuove lo scambio dei moduli recettori del substrato, controllando così l’assemblaggio e il rimodellamento delle CRL. Attraverso questa attività, TIP120A coordina la proteostasi dipendente dall’ubiquitina e influenza la progressione del ciclo cellulare, le risposte allo stress da replicazione del DNA e il turnover dipendente dai segnali di proteine regolatorie chiave. La disregolazione della dinamica delle CRL e dell’equilibrio neddilazione/deneddilazione è stata collegata a instabilità genomica e a un controllo della crescita alterato, rendendo CAND1 un nodo rilevante in vie spesso perturbate nella biologia del cancro. La funzione di TIP120A è studiata anche nel contesto del controllo di qualità dipendente dal proteasoma e dell’adattamento allo stress, in cui la selezione dei substrati da parte delle CRL determina i fenotipi cellulari.
TIP120A Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus CAND1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di CAND1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di CAND1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con CAND1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.