TBC1D15 Plasmide Double Nickase (h): sc-413036-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- TBC1D15 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il TBC1D15 Double Nickase Plasmid (h) e il TBC1D15 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira TBC1D15. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
TBC1D15 Plasmide Double Nickase (h) | sc-413036-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
TBC1D15 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-413036-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TBC1D15 codifica una proteina attivatrice della GTPasi Rab (RabGAP) coinvolta nel controllo del traffico di membrana e della dinamica degli organelli, con ruoli di rilievo nei siti di contatto tra mitocondri e reticolo endoplasmatico. Modulando il trasporto vescicolare dipendente da Rab e collegando il traffico alla morfologia mitocondriale, TBC1D15 contribuisce a processi quali la fissione mitocondriale, la mitofagia e l’adattamento metabolico cellulare. Un’alterata regolazione di queste vie è rilevante per le risposte allo stress e per programmi proliferativi, rendendo TBC1D15 un bersaglio utile per analizzare come il controllo di qualità degli organelli si intersechi con la segnalazione e la bioenergetica. Nella ricerca biomedica, la perturbazione di TBC1D15 supporta studi meccanicistici sull’omeostasi mitocondriale, sul trasporto intracellulare e su fenotipi associati in modelli di cancro e neurodegenerazione.
TBC1D15 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus TBC1D15 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di TBC1D15. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di TBC1D15. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con TBC1D15 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.