STC1 Plasmide Double Nickase (m): sc-423182-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- STC1 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il STC1 Double Nickase Plasmid (m) e il STC1 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Stc1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: STC1 Antibody (1A3): sc-293435
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
STC1 Plasmide Double Nickase (m) | sc-423182-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
STC1 Plasmide Double Nickase (m2) | sc-423182-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
La stanniocalcina 1 (STC1), codificata dal gene murino *Stc1*, è una glicoproteina secreta implicata nell’omeostasi di calcio e fosfato e, più in generale, nella regolazione paracrina della fisiologia tissutale. STC1 modula le risposte cellulari allo stress e i programmi di sopravvivenza, inclusi la funzione mitocondriale, la gestione dello stress ossidativo e l’adattamento metabolico, ed è stata collegata a contesti di segnalazione quali le vie associate all’ipossia. Durante lo sviluppo e nei tessuti adulti, STC1 contribuisce alla biologia vascolare ed epiteliale attraverso effetti su proliferazione, differenziamento e processi legati alla funzione di barriera. Un’espressione deregolata di STC1 è stata riportata in modelli di infiammazione, fibrosi, danno ischemico e biologia del cancro, rendendola un nodo utile per studi meccanicistici sulla segnalazione del microambiente e sulle reti trascrizionali di adattamento allo stress.
STC1 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Stc1 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Stc1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Stc1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Stc1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.