SNX9 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-426112

Descripción general

Snx9 codifica sorting nexin 9 (SNX9), un adaptador con dominios SH3 y PX que acopla la unión a fosfoinosítidos con la remodelación de membranas y la endocitosis mediada por clatrina. SNX9 coordina el ensamblaje de la maquinaria endocítica y reguladora de actina al interactuar con dinamina y N-WASP, favoreciendo la escisión de vesículas, la internalización de receptores y el tráfico de membrana en la membrana plasmática. A través de estas funciones, SNX9 influye en la dinámica de señalización aguas abajo de los receptores internalizados y contribuye a la reorganización del citoesqueleto durante procesos como la migración celular y el recambio de membrana. La desregulación del tráfico endocítico y del control de la actina se ha implicado en la señalización relacionada con el cáncer y en fenotipos neurobiológicos, lo que convierte a Snx9 en un nodo útil para estudios mecanísticos del reordenamiento de vías en contextos relevantes para la enfermedad.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO SNX9 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Snx9 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Snx9 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Snx9 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína SNX9.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Snx9 para la investigación de la señalización de SNX9, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Snx9 críticos para la función de SNX9
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Snx9 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido SNX9 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido SNX9 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Snx9. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR SNX9 (m) y el plásmido HDR SNX9 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Snx9 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Snx9 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.