SLC25A20 Plasmide Double Nickase (h): sc-407585-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- SLC25A20 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il SLC25A20 Double Nickase Plasmid (h) e il SLC25A20 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira SLC25A20. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
SLC25A20 Plasmide Double Nickase (h) | sc-407585-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SLC25A20 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-407585-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SLC25A20 codifica la translocasi carnitina–acilcarnitina (CACT), un trasportatore della membrana mitocondriale interna che scambia acilcarnitine con carnitina libera per consentire l’importazione degli acidi grassi a lunga catena destinati alla β-ossidazione. Questo passaggio di trasporto collega la navetta della carnitina al metabolismo energetico mitocondriale e sostiene la produzione di ATP a partire da substrati lipidici, in particolare nei tessuti ad alta richiesta energetica. L’alterazione di SLC25A20 compromette l’ossidazione degli acidi grassi e può modificare i profili di acilcarnitine, l’equilibrio redox e la segnalazione metabolica a valle. Le varianti di SLC25A20 sono associate a errori congeniti del metabolismo caratterizzati da un utilizzo compromesso degli acidi grassi a lunga catena, rendendolo un bersaglio utile per studiare il trasporto mitocondriale, le risposte allo stress metabolico e le reti di catabolismo lipidico.
SLC25A20 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus SLC25A20 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di SLC25A20. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di SLC25A20. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con SLC25A20 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.