SASPase Plasmide Double Nickase (m): sc-426779-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- SASPase Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il SASPase Double Nickase Plasmid (m) e il SASPase Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Asprv1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
SASPase Plasmide Double Nickase (m) | sc-426779-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SASPase Plasmide Double Nickase (m2) | sc-426779-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene murino **Asprv1** codifica **SASPase**, una proteasi aspartica nota soprattutto per il suo ruolo nella differenziazione epidermica e nella formazione della barriera cutanea. SASPase contribuisce alla processazione proteolitica delle proteine strutturali negli epiteli cheratinizzanti, sostenendo la cornificazione e l’omeostasi dello strato corneo. Un’alterata attività di Asprv1 è stata collegata a programmi di cheratinizzazione compromessi e a disfunzioni della barriera cutanea, rendendolo rilevante per studi sulle risposte allo stress epiteliale e su fenotipi cutanei infiammatori. Nei modelli murini, Asprv1 rappresenta un punto di accesso pratico per analizzare vie regolamentate da proteasi che coordinano la differenziazione terminale e l’integrità tissutale.
SASPase Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Asprv1 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Asprv1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Asprv1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Asprv1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.