Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
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ROR2 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-424100
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- ROR2 Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico ROR2, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: ROR2 Antibody (H-1): sc-374174
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
ROR2 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m) | sc-424100 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
Ror2 codifica il recettore “receptor tyrosine kinase-like orphan receptor 2” (ROR2), un recettore di membrana che agisce principalmente come co-recettore nella segnalazione WNT non canonica, in particolare in risposta a WNT5A. ROR2 regola la polarità planare delle cellule, la dinamica del citoscheletro e la migrazione cellulare direzionale tramite vie a valle che includono la segnalazione JNK/AP-1 e le GTPasi della famiglia Rho. Nella biologia dello sviluppo del topo, l’attività di Ror2 influenza la morfogenesi scheletrica, il patterning degli arti e l’organizzazione dei tessuti, rendendolo un nodo chiave negli studi su differenziamento e segnalazione morfogenetica. Una deregolazione della segnalazione associata a ROR2 è stata collegata a motilità cellulare anomala e a fenotipi invasivi in contesti rilevanti per la malattia, a supporto del suo impiego come strumento meccanicistico per interrogare vie di segnalazione e fenotipi.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO ROR2 (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Ror2 in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Ror2 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Ror2 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina ROR2.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Ror2 per lo studio della segnalazione di ROR2, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni Ror2 critici per la funzione di ROR2
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Ror2 per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal ROR2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal ROR2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Ror2. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal ROR2 Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR ROR2 (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Ror2 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Ror2 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.