Ribosomal Protein S13 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406367

Visão geral

RPS13 codifica a proteína ribossomal S13, um componente essencial da subunidade ribossomal pequena 40S, que dá suporte à montagem do ribossomo, ao processamento de rRNA e à decodificação precisa de mRNA durante a tradução. Por meio do seu papel na síntese proteica citosólica, a RPS13 contribui para o controle do crescimento celular e para a proteostase, e interage com vias sensíveis à capacidade traducional, incluindo respostas adaptativas ao estresse e mecanismos de vigilância nucleolar. A ruptura da homeostase de proteínas ribossomais está ligada a ribossomopatias e tem sido associada a programas de proliferação alterados observados em múltiplos contextos de câncer, tornando a RPS13 um ponto útil para estudar como a produção traducional molda o estado celular. Como fator ribossomal conservado, a RPS13 também é relevante para investigar a dinâmica global da tradução, a tradução seletiva de mRNAs e as consequências do desequilíbrio na biogênese ribossomal.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Ribosomal Protein S13 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene RPS13 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do RPS13, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do RPS13 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Ribosomal Protein S13.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de RPS13 para a investigação da sinalização de Ribosomal Protein S13, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) RPS13 críticos para a função Ribosomal Protein S13
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos RPS13 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Ribosomal Protein S13 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Ribosomal Protein S13 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus RPS13. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Ribosomal Protein S13 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Ribosomal Protein S13 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia RPS13 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo RPS13 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.