Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Rad23B Plasmide Double Nickase (h): sc-402106-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Rad23B Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Rad23B Double Nickase Plasmid (h) e il Rad23B Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira RAD23B. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Rad23B Antibody (H-8): sc-137088
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Rad23B Plasmide Double Nickase (h) | sc-402106-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Rad23B Plasmide Double Nickase (h2) | sc-402106-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene umano **RAD23B** codifica Rad23B, un recettore dell’ubiquitina e fattore di riparo del DNA che collega il riparo per escissione di nucleotidi (NER) con la proteostasi attraverso interazioni con il proteasoma 26S. Rad23B partecipa al riconoscimento e alla processazione di lesioni del DNA che deformano l’elica e contribuisce al mantenimento del genoma dopo danno da UV e da agenti chimici, modulando inoltre la degradazione dipendente dall’ubiquitina mediante il legame a substrati ubiquitinati. Attraverso questi ruoli, RAD23B sostiene le risposte cellulari allo stress replicativo e le vie di segnalazione del danno al DNA che influenzano il controllo del ciclo cellulare. La disregolazione del NER e delle vie ubiquitina–proteasoma che coinvolgono RAD23B è stata associata, in modelli sperimentali, a un’alterata stabilità genomica e a fenotipi rilevanti per il cancro.
Rad23B Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus RAD23B nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di RAD23B. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di RAD23B. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con RAD23B interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.