PRX II Plasmide Double Nickase (h): sc-401330-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- PRX II Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il PRX II Double Nickase Plasmid (h) e il PRX II Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira PRDX2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: PRX II Antibody (A-2): sc-515428
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
PRX II Plasmide Double Nickase (h) | sc-401330-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
PRX II Plasmide Double Nickase (h2) | sc-401330-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PRDX2 codifica la perossiredossina-2 (PRX II), una perossidasi tiolo-dipendente che riduce il perossido di idrogeno e gli idroperossidi organici utilizzando il sistema della tioredossina, contribuendo al mantenimento dell’omeostasi redox. Modellando gradienti locali di H2O2, PRX II modula una segnalazione sensibile allo stato redox che influenza la dinamica delle vie MAPK e NF-κB, la S-glutationilazione delle proteine e le risposte allo stress ossidativo. Nelle cellule umane, PRX II sostiene l’integrità degli eritrociti e programmi citoprotettivi più ampi limitando i danni alle macromolecole indotti dalle ROS e regolando apoptosi e segnalazione infiammatoria. Alterazioni dell’espressione o dell’attività di PRDX2 sono state associate a contesti di stress ossidativo e di segnalazione redox deregolata osservati nella biologia dei tumori, nella neuroinfiammazione e in modelli di malattie cardiometaboliche, a supporto del suo impiego come nodo meccanicistico nella ricerca sulle vie redox.
PRX II Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus PRDX2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di PRDX2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di PRDX2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con PRDX2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.