Pax-9 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403899

Descripción general

PAX9 codifica el factor de transcripción de tipo *paired box* Pax-9, un regulador nuclear que se une al ADN y es esencial para el patrón embrionario y la organogénesis. Pax-9 coordina programas transcripcionales que controlan el desarrollo craneofacial y faríngeo, la odontogénesis y las interacciones epitelio-mesénquima, actuando dentro de redes génicas del desarrollo más amplias que incluyen factores de la familia PAX y vías de homeobox. En genética humana, la alteración de la función de PAX9 se asocia estrechamente con la agenesia dental congénita y anomalías craneofaciales relacionadas, lo que lo convierte en un locus clave para estudiar el control transcripcional del desarrollo. En modelos celulares, Pax-9 constituye un nodo manejable para analizar la especificación de linajes, la regulación génica sensible a morfógenos y las cascadas de diferenciación posteriores.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Pax-9 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen PAX9 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del PAX9 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de PAX9 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Pax-9.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en PAX9 para la investigación de la señalización de Pax-9, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de PAX9 críticos para la función de Pax-9
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de PAX9 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Pax-9 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Pax-9 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus PAX9. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Pax-9 (h) y el plásmido HDR Pax-9 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología PAX9 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana PAX9 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.