OTUD6B Plasmide Double Nickase (h): sc-407492-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- OTUD6B Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il OTUD6B Double Nickase Plasmid (h) e il OTUD6B Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira OTUD6B. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
OTUD6B Plasmide Double Nickase (h) | sc-407492-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
OTUD6B Plasmide Double Nickase (h2) | sc-407492-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
OTUD6B codifica un enzima deubiquitinante della famiglia OTU che idrolizza i coniugati di ubiquitina, contribuendo a determinare la stabilità delle proteine e l’intensità della segnalazione. Invertendo l’ubiquitinazione, OTUD6B partecipa al mantenimento della proteostasi e alla modulazione di vie dipendenti dall’ubiquitina, incluse le risposte allo stress e le cascate di segnalazione legate al sistema immunitario. Alterazioni dell’attività di OTUD6B sono state associate a una disregolazione dell’omeostasi cellulare e sono state investigate nel contesto di fenotipi neuroevolutivi e immunologici, a supporto della sua rilevanza per studi meccanicistici sul controllo del sistema dell’ubiquitina. OTUD6B umano rappresenta quindi un nodo utile per analizzare come la deubiquitinazione influenzi la dinamica delle vie di segnalazione e le decisioni sullo stato cellulare.
OTUD6B Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus OTUD6B nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di OTUD6B. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di OTUD6B. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con OTUD6B interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.