Nup153 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h2): sc-403206-KO-2

Panoramica

NUP153 codifica Nup153, una nucleoporina di impalcatura del complesso del poro nucleare che si localizza al cestello nucleare e contribuisce a organizzare il trasporto nucleocitoplasmatico. Nup153 favorisce l’importazione e l’esportazione nucleare coordinando il traffico dipendente dalle karioferine e interagisce anche con la cromatina alla periferia del nucleo, influenzando la regolazione genica e l’organizzazione del genoma a più alto ordine. Attraverso i suoi ruoli nell’architettura dell’involucro nucleare, nella progressione del ciclo cellulare e nella riassemblaggio mitotico dei pori nucleari, Nup153 incide su vie che governano i programmi trascrizionali e il processamento dell’RNA. La disregolazione del trasporto nucleare e dei componenti del complesso del poro, incluso NUP153, è associata a instabilità genomica e a segnalazione aberrante osservate in molteplici contesti patologici, rendendolo un bersaglio rilevante per studi meccanicistici.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO Nup153 (h2) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene NUP153 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del NUP153 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto NUP153 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina Nup153.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di NUP153 per lo studio della segnalazione di Nup153, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni NUP153 critici per la funzione di Nup153
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di NUP153 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal Nup153 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal Nup153 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus NUP153. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal Nup153 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR Nup153 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia NUP153 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio NUP153 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.