Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
NDRG3 Plasmide Double Nickase (m): sc-424349-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- NDRG3 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il NDRG3 Double Nickase Plasmid (m) e il NDRG3 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Ndrg3. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: NDRG3 Antibody (H-11): sc-514561
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
NDRG3 Plasmide Double Nickase (m) | sc-424349-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
NDRG3 Plasmide Double Nickase (m2) | sc-424349-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene murino Ndrg3 codifica NDRG3, un membro della famiglia NDRG implicato nell’adattamento allo stress cellulare, nella regolazione metabolica e nei programmi di differenziamento. NDRG3 è stato collegato alla segnalazione associata all’ipossia e a vie di risposta al lattato che possono influenzare la sopravvivenza cellulare, la proliferazione e gli output trascrizionali. In molti contesti, l’attività di NDRG3 si interseca con processi che controllano il metabolismo mitocondriale, l’equilibrio redox e l’espressione genica durante lo sviluppo. La disregolazione delle reti legate a NDRG3 è stata associata in letteratura a un controllo della crescita alterato e a fenotipi rilevanti per la malattia, supportandone l’uso come nodo funzionale negli studi su vie e meccanismi.
NDRG3 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Ndrg3 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Ndrg3. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Ndrg3. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Ndrg3 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.