N4BP1 Plasmide Double Nickase (h): sc-406515-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- N4BP1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il N4BP1 Double Nickase Plasmid (h) e il N4BP1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira N4BP1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
N4BP1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-406515-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
N4BP1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-406515-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
N4BP1 (NEDD4 binding protein 1) è un fattore regolatorio citosolico implicato nella segnalazione dipendente dall’ubiquitina attraverso la sua interazione con le ligasi E3 della famiglia NEDD4. È stato associato al controllo di vie infiammatorie e dell’immunità innata, inclusa la modulazione delle risposte legate a NF-κB e degli stati di attivazione cellulare nelle cellule immunitarie. Influenzando il turnover proteico e l’assemblaggio dei complessi di segnalazione, N4BP1 può incidere su programmi trascrizionali, risposte allo stress e sulla sopravvivenza cellulare in modo dipendente dal contesto. La deregolazione della segnalazione associata a N4BP1 è stata oggetto di studi sui meccanismi di disregolazione immunitaria e sulle patologie correlate all’infiammazione.
N4BP1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus N4BP1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di N4BP1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di N4BP1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con N4BP1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.