MTF-2 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-411609

Panoramica

MTF2 (metal response element binding transcription factor 2) codifica MTF-2, un regolatore della cromatina associato al gruppo Polycomb che partecipa a programmi di repressione trascrizionale che controllano la specificazione di linea cellulare e la stabilità dello stato cellulare. MTF-2 è collegato alla funzione di PRC2 e al silenziamento dipendente dalla metilazione di H3K27 in loci dello sviluppo, influenzando l’accessibilità della cromatina e reti regolatorie geniche a lunga distanza. Attraverso questi meccanismi epigenetici, MTF2 contribuisce al controllo della proliferazione, della differenziazione e degli output trascrizionali in risposta allo stress. Un’attività deregolata di MTF2 è stata riportata in studi di biologia del cancro e di disturbi dello sviluppo, in cui un’alterata attività di targeting dei Polycomb può perturbare i profili di espressione genica.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO MTF-2 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene MTF2 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del MTF2 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto MTF2 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina MTF-2.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di MTF2 per lo studio della segnalazione di MTF-2, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni MTF2 critici per la funzione di MTF-2
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di MTF2 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal MTF-2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal MTF-2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus MTF2. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal MTF-2 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR MTF-2 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia MTF2 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio MTF2 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.